Մաքրման սարքավորում օլիգոյի մաքրման համար

1. Գել էլեկտրոֆորեզի քրոմատոգրաֆիայի մաքրում
Մաքրման համար օգտագործեք դենատուրացնող պոլիակրիլամիդ գելային էլեկտրոֆորեզի քրոմատոգրաֆիա:Դենատուրացնող միջոցը հիմնականում 4M ֆորմամիդն է կամ 7M միզանյութը, ակրիլամիդի կոնցենտրացիան 5-15%-ի սահմաններում է, իսկ մետակրիլամիդի մասնաբաժինը հիմնականում 2-10% է:
Էլեկտրաֆորեզից հետո ուլտրամանուշակագույն լույսի ճառագայթման տակ անհրաժեշտ է որոշել նուկլեինաթթվի շերտի դիրքը, թիրախային նուկլեինաթթուն պարունակող գելը կտրել, նուկլեինաթթուն ջարդել և տարրալվացնել, այնուհետև տարրալվացման լուծույթը խտացնել, աղազրկել, քանակականացված և լիոֆիլացված:

2. DMT-On, HPLC մաքրում
Ընտրեք DMT-On ռեժիմը սինթեզի ընթացքում, հում արտադրանքը ցենտրիֆուգվել և կենտրոնացվել է սենյակային ջերմաստիճանում՝ ամինոլիզից հետո ավելորդ ամոնիակը հեռացնելու համար:
Տարանջատումն իրականացվել է օգտագործելով C18 սյունակ՝ ացետոնիտրիլով և 10% տրիէթիլամին-քացախաթթուով (TEAA) որպես էլուենտ:Լվացքի ավարտից հետո այն խտացվում է, իսկ հետո DMT խումբը հանվում է տրիֆտորքացախաթթվով:Չեզոքացումից հետո որոշ աղեր և փոքր մոլեկուլներ հանվում են կտրված խողովակի միջոցով և վերջապես աղազրկվում:

Այս մեթոդով կարելի է ավելի բարձր մաքրությամբ արտադրանք ստանալ, սակայն անհրաժեշտ է ուշադրություն դարձնել դեպուրինացիայի առաջացմանը:

3. DMT-Off, HPLC մաքրում
Սինթեզի ընթացքում ընտրեք DMT-Off-ը, և հում արտադրանքը ցենտրիֆուգվեց և խտացվեց սենյակային ջերմաստիճանում՝ ամոնոլիզից հետո ավելորդ ամոնիակը հեռացնելու համար:
Տարանջատումն իրականացվել է օգտագործելով C18 սյունակ՝ ացետոնիտրիլով և 10% տրիէթիլամին-քացախաթթվով ջրի մեջ որպես լուծիչ:Բաժանման ավարտից և քանակականացումից հետո ալիքոտները լիոֆիլացվում են:

Այս մեթոդը պահանջում է տարանջատման պայմանների մանրակրկիտ ճշգրտում, ինչպես նաև կարող է ձեռք բերել համեմատաբար մաքուր թիրախային մոլեկուլներ: