ԴՆԹ-ի սինթեզի հիմնական սկզբունքը

Քիմիական ԴՆԹ-ի սինթեզը հիմնված է պինդ փուլային սինթեզի ռազմավարության և ֆոսֆորամիդիտների քիմիայի վրա:ԴՆԹ-ի կենսաբանական սինթեզից տարբերվող նյութը քիմիական ԴՆԹ-ի սինթեզի նյութն է DMT (4, 4-դիմեթոքսիտրիտիլ) և ֆոսֆորամիդիտով ձևափոխված դեզօքսիրիբոքսիսիդը, ինչպես ցույց է տրված Նկար 1-ում: ԴՆԹ-ի սինթեզն իրականացվում է ամուր հենարանի վրա (մենք կարող ենք առաջարկել տարբերՕլիգո սինթեզի սյունակ), այսինքն՝ CPG (վերահսկվող ծակոտկեն ապակի) և PS (պոլիստիրոլ), և ամբողջ սինթեզը կատարվում է միԴՆԹ/ՌՆԹ սինթեզատոր, որը մեր հիմնական սարքավորումն է, ունի տարբեր մոդելներ, ինչպիսիք են՝ HY Single Channel Synthesizer, HY-12, HY-192 և այլն, սինթեզի ուղղությունը 3'-ից 5' է, և նուկլեոտիդը պինդ հենակետին է ներմուծվում մեկի միջոցով: սինթեզի ցիկլը.Սովորաբար սինթեզի ցիկլը պարունակում է չորս քայլ՝ Ապապաշտպանություն, Միացում, Կափարիչ և Օքսիդացում (Նկար 2):Deprotection-ը նախատեսված է հեռացնելու DMT խումբը պինդ հենարանի վրա կամ 5' հիդրօքսիլ խումբը նախորդ նուկլեոզիդի վրա, 3% տրիքլորաքացախաթթուն դիքլորմեթանում օգտագործվում է որպես ապապաշտպանական ռեակտիվ:Այնուհետև ֆոսֆորամիդիտով ձևափոխված դեզօքսիռիբոքսիսիդին թույլատրվել է մերկացնել հիդրօքսիլ խումբը ակտիվացնողի օգնությամբ, այսինքն՝ 5-էթիլթիոտետրազոլը կամ 4, 5-դիցիանոիմիդազոլը, ձևավորելով ֆոսֆիտետրիեստեր (III), և իրականացրել է միացման քայլը:Կափարիչային քայլն իրականացվում է միացման փուլի ընթացքում չհակազդող հիդրօքսիլ խումբը արգելափակելու համար, որպեսզի նվազագույնի հասցվի անցանկալի արատների հաջորդականությունների ձևավորումը:Վերջապես, անկայուն ֆոսֆիտետրիեստերը (III) օքսիդացվում է քիմիական կայուն ֆոսֆորտրիեստերի (V) յոդի հետ որպես օքսիդանտ պիրիդինի ներկայում:

Սինթեզված ԴՆԹ-ն կարող է պառակտվել ամինոլիզով պինդ հենարանից, ֆոսֆորտրիեստերի վրա 2-ցիանոէթիլ պաշտպանված խումբը և նուկլեոբազայի ամիդը միաժամանակ ճեղքվում են, սինթեզի թիթեղները և դարակաշարերի սինթեզի սյուները տեղադրվում են անմիջապես ռեակցիայի խցիկում: որԱպապաշտպանության սարքավորում.Հում ԴՆԹ-ն կարող է պատրաստվել HPLC-ով, էլեկտրոֆորեզով և OPC-ով ըստ պահանջի, մենք կարող ենք նաև տրամադրել ձեզՄաքրման սարքավորումհետմշակման համար:

ԴՆԹ-ի սինթեզի հիմնական սկզբունքը1

Նկար 1. dA-ի քիմիական կառուցվածքըBzֆոսֆորամիդիտ.

ԴՆԹ-ի սինթեզի հիմնական սկզբունքը2

Նկար 2. ԴՆԹ-ի քիմիական սինթեզի մեխանիզմը:


Հրապարակման ժամանակը՝ օգ-09-2022